目的 探讨内质网应激信号通路在胆固醇诱导的胰岛β细胞凋亡中的作用及其相关机制。
方法 体外培养大鼠INS-1细胞株，经胆固醇与内质网应激抑制剂4-PBA或者自噬抑制剂E64d和Pepstatin A单独或共同处理后，通过Western blot检测GRP78、p-eIF2α、ATF-4、CHOP、cleaved caspase-3、bcl-2、bax及自噬标志蛋白LC3表达的变化；通过免疫荧光检测LC3蛋白的转位；通过DAPI染色后经荧光显微镜观察细胞核形态及半定量计算细胞凋亡率。
结果 INS-1细胞经胆固醇处理后，cleaved caspase-3表达明显上调，bcl-2/bax比值降低，细胞凋亡增加，同时内质网应激相关蛋白GRP78、p-eIF2α、ATF-4、CHOP的表达显著增加，LC3II的表达及LC3I型向II型的转换亦明显增加，并且上述改变可以被内质网应激抑制剂4-PBA所取消。此外，自噬抑制剂E64d和Pepstatin A促进胆固醇处理后INS-1细胞cleaved caspase-3表达，降低bcl-2/bax比值，促进细胞凋亡。
结论 内质网应激信号通路参与了胆固醇诱导的胰岛β细胞凋亡，抑制自噬加重内质网应激引起的细胞凋亡，暗示自噬在胆固醇诱导的细胞凋亡中发挥了保护作用。