目的 ACSS2通过捕获醋酸盐作为碳源为细胞提供乙酰辅酶A的主要来源。其在细胞增殖、代谢及基因表达中充当重要角色 ,而胰岛β细胞的增殖与再生对于治疗2型糖尿病有至关重要的作用,前期结果证实胰岛β细胞存在ACSS2基因高表达,相关研究结果提示ACSS2可能参与能量调控代谢和营养缺乏及缺氧条件下胰岛β细胞的存活。我们拟研究ACSS2与胰岛β细胞的增殖、代谢关系。
方法 通过慢病毒包装shRNA对小鼠胰岛瘤细胞NIT1细胞中ACSS2表达进行干扰,给予细胞低氧低糖刺激,通过共聚焦荧光显微镜观察细胞线粒体的形态、大小及数量的变化、流式细胞仪检测细胞凋亡、免疫印迹技术检测下游基因的表达情况,从体外方面通过下调ACSS2表达来阐述ACSS2在小鼠胰岛β细胞代谢、再生、分泌、增殖凋亡及糖脂代谢中的调控机制。
结果 低氧低糖条件ACSS2干扰组NIT1细胞线粒体体积增大、嵴排列紊乱,与未干扰组相比有统计学差异。ACSS2干扰组细胞周期增长,细胞凋亡增多、凋亡相关基因表达增高,胰岛素分泌颗粒增多,与未干扰组相比有统计学意义。