目的 探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用下大鼠肝窦内皮细胞(mHSECs)植物血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的表达调控机制及窗孔形态变化特点。
方法 分离、培养大鼠肝窦内皮细胞,使用不同浓度的ox-LDL (50、100和150 ug/ml)共同干预mHSECs,并设立正常对照组(LDL干预)。培养12、24、48小时后,RT-PCR和westernblot检测各组细胞LOX-1的mRNA和蛋白表达水平。进一步扫描电镜观察不同浓度的ox-LDL (50、100和150 ug/ml) 干预下培养12、24、48小时后mLSECs的窗孔分布、数量和直径变化的特点。用SPSS19.0软件采用t检验进行数据分析。
结果 大鼠肝窦内皮细胞在mRNA和蛋白水平都有LOX-1的表达。ox-LDL在0-150ug/ml范围内LOX-1mRNA、蛋白表达水平呈现剂量-效应关系(P<0.05),而浓度为150ug/ml 的ox-LDL与肝窦内皮细胞共同培养时,LOX-1mRNA、蛋白表达水平均下降,两组间差异均有统计学意义(p<0.05);在oxLDL刺激下mLSECs窗孔形态结构发生了明显改变,与对照组比较,mLSECs窗孔分布稀疏,数量减少,窗孔直径变小,有的区域甚至消失,两组差异均有统计学意义(p<0.05)。
结论 大鼠肝窦内皮细胞上有LOX-1的表达;ox-LDL可上调肝窦内皮细胞LOX-1的表达,并且在一定的范围内LOX-1的表达具有时间和浓度依赖性;ox-LDL可引起mLSECs窗孔形态结构发生改变,使窗孔数量减少、直径变小及分布稀疏,导致发生mLSECs去窗孔化,这可能是OxLDL对肝窦内皮细胞损伤的重要机制之一。