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LOX-1对氧化型低密度脂蛋白条件下人脐静脉内皮细胞功能的影响及作用机制的研究
作者:牛瑞兰|刘静|王云芳 来源:甘肃省人民医院内分泌科|甘肃省内分泌代谢病重点实验室 浏览次数:0次

目的 探讨LOX-1对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)培养条件下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)合成和分泌血管活性物质的影响。

方法 从新鲜脐带中分离培养且鉴定HUVECs,实验随机分为对照组、10ug/ml ox-LDL40ug/ml ox-LDL组、80ug/ml ox-LDL组、250ug/ml多聚肌苷酸+80 ug/ml ox-LDL组,分别培养到62448小时。MTT检测细胞存活率;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测ET-1的表达;分光光度法检测一氧化氮合酶(NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性;实时荧光定量RT-PCR检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、ET-1JNK mRNA的表达;免疫荧光法检测磷酸化氨基末端蛋白激酶(pJNK)的表达。

结果 与正常对照组比较,ox-LDL状态下细胞存活率降低;NO的分泌在6h24h升高而在48h降低,与NOSiNOS活性的变化一致;而ET-1的表达在24h48h都是升高的,且与mRNA ET-1的变化相同;JNK信号通路被激活,其在核内表达的荧光值增高。与ox-LDL组比较,250ug/ml多聚肌苷酸干预后细胞的存活率升高;改变NO的分泌和NOSiNOS的活性,上调mRNA eNOS的表达;明显的下调ET-1mRNA ET-1的表达,使ET-1/NO比例下降;使p-JNK核内表达的荧光值降低。

结论 ox-LDL所致人脐静脉内皮细胞功能有损伤作用,并呈时间依赖性和浓度依赖性,且此作用可能与ox-LDL条件下LOX-1所介导的JNK细胞传导通路有关。

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