目的 观察维生素D补充治疗对糖尿病大鼠睾丸功能的影响,并探讨其可能的机制。
方法 实验动物分组:糖尿病(DM)组、糖尿病维生素D高剂量(HD)组、糖尿病维生素D低剂量(LD)组、空白正常(NC)组。LD组、HD组分别给予骨化三醇0.03μg/(kgd)、0.1μg/(kgd)灌胃,DM、NC组给予花生油灌胃。12周后测定体重(BW)、睾丸重量(TW)、睾丸指数(TW/BW)、血糖、血清钙、磷、25(OH)D3、睾酮(T)、精子数量、畸形精子数、畸形率;分别于光镜、透射电镜下观察睾丸组织形态学改变;qRT-PCR检测睾丸StAR、CYP11A1、Hsd3β1、Hsd17β3、CYP19A1、SRD5A1的mRNA表达水平;Western Blot测定睾丸VDR、IL-1β、Bax、Bcl-2、COX-2、 Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平。
结果 相较于NC组,DM组可观察到:BW、TW、TW/BW降低,T降低(P<0.05);光镜:睾丸Leydig细胞、生精细胞排列疏松、数量减少,部分生精小管可见到生精阻滞,管腔内精子稀疏;透射电镜:睾丸Leydig细胞及生精细胞线粒体肿胀,嵴消失,内质网肿胀且数量减少,呈空泡样改变;精子数量减少,畸形率升高(P<0.05);上述mRNA表达均减低(P<0.05);VDR、IL-1β、Bax、COX-2、 Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-3表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.05)。HD、LD组大鼠上述指标较DM组改善, LD组多数指标改善优于HD组。
结论 糖尿病可引起大鼠睾丸功能受损。补充维生素D对糖尿病大鼠睾酮合成、精子生成均有保护作用,其机制可能是通过降低炎症因子和减轻细胞凋亡实现的。