目的 Vaspin是一种具有胰岛素增敏效应的脂肪细胞因子。肝脏是糖代谢以及胰岛素抵抗的主要器官之一。本研究旨在探讨Vaspin对大鼠肝细胞对葡萄糖摄入的影响,并分析Vaspin对肝细胞PI3K/Akt信号通路及其下游分子葡萄糖转运体-2(GLUT-2)和糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)的影响。
方法 培养BRL大鼠肝细胞,分别用不同浓度(0、20、40、80、160、320 μg/L)Vaspin干预8h。每组加入100 μmol/L的荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG),30min后,荧光酶标仪检测肝细胞内2-NBDG的荧光强度,评估肝细胞摄入葡萄糖的水平。Western blot测定磷酸化的Akt和GSK-3β水平。Real time-PCR、Western blot分别检测GLUT-2的mRNA和蛋白表达水平。用100 nmol/L的PI3K抑制剂Wortmannin预处理细胞后,上述方法检测Vaspin对肝细胞摄入2-NBDG、 Akt、GLUT-2和GSK-3β的影响。
结果 与对照组相比,Vaspin处理后的肝细胞内2-NBDG的荧光强度明显增加,磷酸化的Akt水平、磷酸化的GSK-3β的水平明显增加,GLUT-2的mRNA和蛋白的水平增加,且随Vaspin浓度升高作用越明显(P<0.05);加入抑制剂Wortmannin后,Vaspin对肝细胞的上述作用减弱(P <0.05)。
结论 在大鼠肝细胞中,Vaspin可增强PI3K/Akt信号通路的传导,增加GLUT-2的表达,抑制GSK-3β的活性,增加肝细胞对葡萄糖的摄入和肝糖原的合成,改善胰岛素抵抗。