目的 甜味剂赤藓糖醇在糖尿病饮食治疗中的应用日趋广泛,本实验研究赤藓糖醇能否进入PC12细胞,对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤是否具有保护作用,对线粒体应激、内质网应激相关因子Caspase-9、 Caspase- 12及热休克蛋白(Hsp70 )、TXNIP这些的表达是否产生影响。
方法 1.采用RPMI-1640培养基培养PC12细胞,配制不同浓度赤藓糖醇对PC12细胞进行处理,分离细胞内外液,应用反向高效液相色谱法测定PC12细胞内外液赤藓糖醇含量。2.测定细胞存活率(MTT法)、LDH泄漏量和GSH含量3.采用Western-blot的方法检测赤藓糖醇对Caspase-9、Caspase-12、Hsp70、TXNIP蛋白表达的影响。
结果 1.细胞内液中可测得赤藓糖醇的色谱峰;.赤藓糖醇可减轻H2O2对PC12细胞的氧化损伤程度,明显提高细胞存活率(p<0.05),减少细胞LDH泄漏(p<0.01),提高细胞内GSH含量(p<0.01);赤藓糖醇高剂量组有抑制PC12细胞损伤后Caspase-9表达的作用(p<0.05),模型组Caspase-12表达明显升高(p<0.05)。
结论 1.细胞内液中可测得赤藓糖醇色谱峰,提示赤藓糖醇能够进入PC12细胞;2.赤藓糖醇可通过减少H2O2 所致PC12细胞的LDH泄漏、提高细胞内GSH含量以提升细胞存活率,并减少模型组细胞内Caspase-9和Caspase-12蛋白的表达,抑制H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤。