目的 高糖饮食可通过影响外周组织胰岛素敏感性而间接促进脂肪肝发生，然而高糖饮食如何直接调控肝脏甘油三酯（TG）代谢，目前尚不明确。本研究为探讨高糖饮食对肝脏脂代谢的直接调控作用，从基因芯片筛选结果出发，旨在：1）在动物和细胞水平明确转录因子MafB促进肝脏TG沉积的作用。2）阐明MafB促进肝脏脂肪沉积的分子机制。

方法 

1）高糖喂养6周建立脂肪肝模型，利用基因芯片筛选阳性表达基因，并进一步验证，证实MafB在脂肪肝中高表达。

2）分离培养原代肝细胞，予以葡糖糖刺激后检测MafB表达。

3）腺病毒过介导肝脏过表达MafB，检测全身糖脂代谢表型、肝脏TG含量及脂代谢相关基因表达。

4）利用腺病毒包被的shRNA，干扰小鼠肝脏MafB表达后予以高糖喂养，检测肝脏TG含量及脂代谢基因表达。

5）构建包含野生型／突变型Chrebp启动子的报告基因载体，检测MafB对于Chrebp启动子的转录调控作用。

结果

1）在高糖喂养组，肝脏TG合成相关基因表达上调，分解相关基因表达下调；通过基因芯片发现高糖喂养小鼠肝脏MafB表达上调，并进一步在RNA和蛋白水平验证了MafB的上调。

2）在原代肝细胞予葡糖糖刺激后，胞内TG含量增多，TG合成关键酶基因表达上调，同时MafB表达增加。

4）与对照相比，过表达MafB后，小鼠血糖及胰岛素敏感性无明显差异，而肝脏及血清TG水平显著升高，Chrebp及TG合成关键酶基因表达上调。

4）干扰MafB表达后予高糖喂养，高糖诱导的肝脏TG沉积作用受抑制；肝脏Chrebp及脂肪酸合成关键酶基因表达明显下调。

5）体外报告基因实验证实，MafB对于野生型Chrebp启动子有转录激活作用，而相应的结合位点突变后，转录激活作用消失。

结论 高糖饮食诱导肝脏转录因子MafB表达，MafB通过转录激活Chrebp，上调Chrebp基因表达，进而促进TG合成，参与高糖饮食诱导的脂肪肝发生。