目的 探讨胰高血糖素样肽1(Glucagon
like peptide 1,GLP-1)对间充质干细胞(Mesenchymal
stem cells,MSCs)向胰岛素样细胞分化,及其免疫调节作用的影响。
方法 采用Foicoll分离法从C57BL/6小鼠骨髓分离MSCs,从脾脏分离脾细胞(splenocytes);CCK8检测GLP-1对MSCs增殖水平的影响;real-time
PCR检测MSCs胰岛样细胞分化前后胰岛细胞相关基因以及胰岛干细胞相关分子基因表达;ELISA法检测GLP-1对MSCs分泌胰岛素水平的影响;3H实验测定GLP-1作用于MSCs对T淋巴细胞增殖的影响。
结果 GLP-1处理组MSCs细胞增殖能力增强,处理24h和48h后,较对照组OD450吸光度明显升高(p = 0.042、p = 0.043)。在诱导MSCs向胰岛样细胞分化的过程中,MSCs细胞形状逐渐变圆,但并未发现有明显的胰岛样细胞团形成;分化后的MSCs细胞与正常MSCs相比,INS2、GCG、NGN3-1、PDX-1均有明显上调的表达(p = 0.02,p = 0.017,p = 0.02,p = 0.011)。MSCs分化所得细胞在葡萄糖诱导下具有胰岛素分泌功能(p = 0.027),显著高于未分化MSCs(p = 0.029),但分泌量未能达到islet
cells的水平(p = 0.009)。GLP-1预处理的MSCs相比对照组MSCs,其对T淋巴细胞增殖的抑制作用显著增强(p = 0.015)。
结论 GLP-1可能通过促进MSCs对损伤胰岛细胞的修复作用、以及对胰腺组织炎症反应有抑制作用,从而提高MSCs对糖尿病的治疗效果,两者的联合治疗可为糖尿病治疗提供新策略。