目的 研究TGFβ1、CTGF、Fetuin-A在糖尿病血管钙化大鼠中的表达情况,探讨TGFβ1、CTGF、Fetuin-A对糖尿病血管钙化的作用。
方法 肌注维生素D3加尼古丁灌胃制备大鼠血管钙化模型,同时腹腔注射STZ诱导糖尿病模型。八周龄健康雄性Wistar大鼠36只共分为四组,即正常对照组(CON)、糖尿病组(DM)、钙化组(VDN)和糖尿病加钙化组(DM+VDN)。各组大鼠共同喂养16周后,用免疫组化法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠血管中的表达,酶联免疫吸附法(Elisa)检测血清胎球蛋白-A(Fetuin-A)表达水平,另外检测血管钙含量、血管碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OC)含量,以及血清各项生化指标,并进行胰腺HE,主动脉Von Kossa染色。
结果 1.各组大鼠主动脉免疫组化检测显示,DM+VDN组TGFβ1和CTGF表达最高,细胞质内呈现大量棕黄色物质。与CON组比较,DM+VDN组血清Fetuin-A表达降低(P<0.05)。2.DM+VDN组和VDN组大鼠血管钙含量较CON组明显升高(P<0.01,P<0.05),且DM+VDN组较VDN组亦升高(P<0.01)。DM+VDN组大鼠血管碱性磷酸酶活性较CON组明显升高(P<0.01)。3.DM+VDN组和DM组大鼠空腹血糖与CON组比较均显著升高(P<0.01)。DM+VDN组和DM组血清胰岛素水平较CON组均降低(P<0.05)。4.胰腺HE染色在DM组和DM+VDN组均可见胰岛体积缩小,中心空泡化;主动脉Von Kossa染色在VDN组和DM+VDN组可见中膜钙沉积。
结论 糖尿病可以加重血管钙化,在糖尿病血管钙化大鼠主动脉中TGFβ1、CTGF表达升高,而血清Fetuin-A水平下降,其机制有待进一步探讨。