目的 观察骨钙素对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及对Sirt2、FoxO1、GLUT4和脂联素的影响,探讨骨钙素通过Sirt2/FoxO1通路控制肥胖、改善胰岛素抵抗、遏制2型糖尿病的机制。
方法 将细胞接种到培养板中,加入诱导分化剂诱导其分化。设a(空白组),b、c、d组每孔分别加入100pg、1ng、10ng骨钙素,在诱导分化后第12天用ELISA法检测各组中Sirt2、FoxO1以筛选最佳骨钙素剂量(10ng)。另设骨钙素组为A组,非干预组为B组,骨钙素+SGK2干预组为C组,A组每孔加入10ng的骨钙素,C组每孔加入骨钙素10ng及1000μM的SGK2。诱导分化后第12天用油红O染色,观察细胞形态及脂肪含量变化,分光光度计510nm波长处测量OD值。Real-Time PCR法检测各组中Sirt2、FoxO1、GLUT4和脂联素的表达。
结果 骨钙素与Sirt2(r=0.704,p<0.05)及FoxO1(r=0.653,p<0.001)呈正相关。A组细胞中Sirt2(p<0.001)、 FoxO1(p<0.001)、GLUT4(p<0.05)和脂联素(p<0.001)的mRNA表达量均较B组升高。C组细胞中Sirt2(p<0.001)、 FoxO1(p<0.001)、GLUT4(p<0.05)和脂联素(p<0.001)的mRNA表达量较A组降低。B、C组OD值明显高于A组(p<0.001)。
结论 骨钙素能够抑制小鼠3T3-L1前脂肪细胞的过度分化。提示骨钙素可能通过Sirt2/FoxO1的通路发挥作用调节脂联素及GLUT4的表达从而控制肥胖、改善胰岛素抵抗、希望能遏制2型糖尿病的发生发展。