目的 探讨二甲双胍对人永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞株)的保护作用及机制。

方法 晚期糖基化终产物受体（RAGE）重组慢病毒包装使具有无限增殖的HaCaT细胞RAGE过表达，并通过RT-PCR和RLISA从基因和蛋白角度证实。进而通过Western blot检测HaCaT细胞RAGE过表达组、双胍干预组等各组NF-KB/P-NF-KB、AKT/ P-AKT、JNK/ P-JNK、ERK/ P-ERK、P38/P-P38、IL-1b、IL-6、TNF-a、COX-2、ICAM-1等炎症相关蛋白。用流式细胞仪进行细胞DNA含量测定各组细胞各细胞周期所占比例。线粒体膜电位(MMP)检测各细胞组线粒体功能状态。Annexin V检测各组细胞早期凋亡。

结果 RAGE过表达组较对照组和空载体组P-P38、NF-κB和下游因子ICAM1、COX-2、IL-6、IL-1β和TNF-α表达增强、而P-ERK1/2、P-JNK、P-AKT表达减弱；双胍组可纠正P-ERK1/2、P-JNK、P-AKT、NF-κB及其下游因子ICAM1、COX-2、IL-6表达变化（P<0.01），但对P-P38、IL-1β和TNF-α表达无影响（P>0.05）。RAGE过表达组较对照组G1期细胞DNA含量明显增加（P<0.01）、S期明显减少（P<0.01）；而双胍干预后G1期细胞DNA含量明显减低（P<0.01）、S期明显增高（P<0.01）。RAGE过表达组MMP明显减低（P<0.01），而双胍干预组则有效逆转（P<0.01）。

结论 RAGE过表达与人角质形成细胞的早期凋亡以及线粒体功能下降有关，其机制可能与NF-κB和下游因子ICAM1、COX-2、IL-6、IL-1β和TNF-α的改变有关；二甲双胍对角质形成细胞凋亡的保护作用可能与之有关。