目的 通过观察IGT合并NAFLD大鼠肝细胞内质网应激变化、脂肪变性肝细胞数/总肝细胞数变化,并对两者行相关分析,探讨内质网应激对肝细胞脂肪变性的影响。
方法 68 大鼠,随机分NGT 组(普通饲料)、IGT/NAFLD组(高糖高脂饲料)。12周时行OGTT,OGTT2h介于7.8~11.1mmol/L为IGT造模成功。随机取8只做肝组织 HE 染色,光镜下观察肝小叶内 1/3 以上肝细胞呈弥漫大泡性脂肪变性及气球样变者为IGT合并NAFLD造模成功。高糖高脂喂养前分别处死2组大鼠各 1/2 , RT-PCR 法检测CHOP mRNA、SREBP-1c mRNA 表达,Western Blotting 检测 CHOP 蛋白表达。成模后处死其余大鼠,再行以上指标检测。各组间两两比较采用单因素方差分析(ANOVA),LSD-t检验,同组内参数比较采用t检验,P≤0.05为差异有统计学意义。相关性采用Pearson相关分析。
结果 1.高糖高脂喂养前,NGT组与IGT/NAFLD组相比,脂肪变性肝细胞数/总肝细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。成模后,与同期NGT组及喂养前IGT/NAFLD组比较,IGT/NAFLD组增高(P<0.05)。
2.高糖高脂喂养前,NGT组与IGT/NAFLD组相比,CHOP mRNA、SREBP-1c mRN、 肝脏CHOP蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。成模后,与同期NGT组及喂养前IGT/NAFLD组比较,表达均增多(P<0.05)。
3.肝细胞CHOP 蛋白、CHOP mRNA、SREBP-1c mRNA的表达与脂肪变性肝细胞数/总肝细胞数呈显著正相关.
结论 IGT合并 NAFLD阶段大鼠肝细胞内质网应激增强,且与肝细胞脂肪变性显著相关,进一步加重了肝细胞脂肪变性。