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血管紧张素转化酶2改善线粒体功能及减少氧化应激提高胰岛功能
作者:史婷婷|杨芳远|曹曦|李倩|袁明霞|杨金奎 来源:首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科|糖尿病防治研究北京市重点实验室 浏览次数:0次

目的 血管紧张素转化酶2ACE2)在胰岛线粒体功能、氧化应激及凋亡的作用。

方法 选取8周龄雄性db/db小鼠随机分组胰腺局部注射ACE2-腺病毒及对照腺病毒,7天后腹腔注射葡萄糖评估糖耐量及胰岛素分泌功能,Ficoll法分离纯化胰岛,葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)评估原代胰岛功能,共聚焦观察胰岛钙离子内流,DHE探针标记及流式细胞仪测定线粒体内活性氧(ROS)含量,JC-1染色测定线粒体膜电位,比色法测定胰岛ATP含量,Western印迹法测定糖代谢、氧化应激及凋亡相关蛋白表达。体外实验,Ficoll法分离8周龄雄性C57BL/6小鼠胰岛,棕榈酸与ACE2腺病毒或对照腺病毒共孵育,GSIS评估胰岛功能后检测胰岛线粒体功能、氧化应激及凋亡相关表达。

结果 胰腺注射ACE2腺病毒能够改善db/db小鼠糖耐量及胰岛素分泌功能。ACE2病毒注射组胰岛的葡萄糖转运蛋白2GLUT2)蛋白含量及钙离子内流水平均明显高于对照腺病毒组(p<0.05)。ACE2病毒注射明显抑制NADPH途径的ROS产生(p<0.05),提高线粒体膜电位及增加线粒体ATP含量(p<0.05),抑制JNK-AMPK-Caspase3 凋亡途径相关蛋白表达(p<0.05)。体外实验,ACE2病毒孵育明显改善高脂环境诱导的胰岛功能损伤(p<0.05),抑制ROS产生(p<0.05),减少JNK-AMPK-Caspase3凋亡途径相关蛋白的含量。

结论 ACE2过表达可以通过改善线粒体功能及减少氧化应激改善胰岛功能及减少凋亡,可能是糖尿病治疗的靶点之一。
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