目的 IL-1β、IFN-γ、H2O2是导致胰岛β细胞凋亡的重要因素,本研究旨在研究氯喹是否可以减轻由细胞因子和ROS引起的胰岛β细胞凋亡,氯喹不仅能有效治疗疟疾,还可能是治疗2型糖尿病的新途径。
方法 INS 1E细胞来源于大鼠的胰岛素瘤,在5%小牛血清RPMI 1640培养基中,置于5%的CO2孵箱。从6-8周的ATM+/+、ATM-/+、ATM-/-小鼠获取胰腺。用蛋白免疫印迹法测定Caspase 3。用MTT试剂盒(Promega公司)测定INS 1E细胞增殖和活性。用细胞凋亡探测ELISA试剂盒(Roche公司)测定INS 1E凋亡。用ELISA试剂盒(Millipore公司)测定胰岛素。采用微软的Excel软件做统计学分析,数据表示为均数±标准差,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。
结果 1、氯喹和胰岛素在丝氨酸437位点激发了PKB/Akt的磷酸化。2、氯喹有效保护细胞因子侵袭的INS 1E细胞。3、氯喹保护胰岛细胞的原因是通过ATM基因。4、氯喹提高了ATM的活性,抑制了由细胞因子引起的的胰岛细胞凋亡。5、氯喹减轻了过氧化氢引起的INS 1E细胞凋亡。
结论 1、2型糖尿病胰岛功能衰竭与胰岛β细胞凋亡有关,氧化应激和各种细胞因子可引起胰岛β细胞凋亡。2、通过体外、体内实验证明,氯喹可以减轻由氧化应激和细胞因子引起的胰岛β细胞凋亡。3、氯喹通过激活ATM,从而激活PKB/Akt,减轻胰岛β细胞凋亡。氯喹可能成为治疗2型糖尿病的新途径。