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白藜芦醇干预后db/db糖尿病肾病小鼠miRNA差异表达谱的筛选和验证
作者:陈晟|鲁一兵 来源:南京医科大学第二附属医院 浏览次数:0次

目的 研究白藜芦醇干预后db/db糖尿病肾病小鼠miRNA的差异表达谱,为进一步研究相关miRNA在白藜芦醇治疗糖尿病肾病中的作用机制打下基础。

方法 小鼠分为正常小鼠组(CON)、db/db糖尿病肾病小鼠组(db/db)、加用10mg/kg白藜芦醇干预12db/db糖尿病肾病小鼠组(RES),每组10只小鼠,分离三组小鼠的肾脏组织,采用Affymetrix miRNA 4.0芯片筛选miRNA的差异表达谱,主要比较db/db组与RESmiRNA的表达差异,利用TargetscanPITAmicroRNAorg3个数据库对差异miRNA进行靶基因预测,GO(基因功能) KEGG Pathway(信号通路)分析靶基因功能。根据芯片筛选结果,选取差异最显著的miRNA,用SYBR Green实时定量RT-PCR方法进行验证。

结果 芯片结果显示,db/db组与CON组相比,有8miRNA上调、15miRNA下调,RES组与db/db组相比有12miRNA上调、21miRNA下调,RES组与CON组相比,有15miRNA上调、7miRNA下调。其中mmu-miR383-5pmmu-miR205-5pmmu-miR31-5p变化明显(Fold change>2),三者均在糖尿病肾病小鼠的肾脏组织中(db/db vs. CON)显著上调(p<0.05),在白藜芦醇干预后(RES vs. db/db)表达水平显著下降(p<0.05),实时PCR验证三者表达水平及变化趋势与芯片一致。

结论 白藜芦醇对db/db糖尿病肾病小鼠miRNA表达谱产生影响,其中mmu-miR383-5pmmu-miR205-5pmmu-miR31-5p变化最明显(Fold change>2),可能与白藜芦醇治疗糖尿病肾病的机制有关。


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