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人脐带间充质干细胞对高糖致足细胞凋亡的作用机制研究
作者:柳刚|齐文文|吕莎莎|明彤彤 来源:山东大学第二医院|山东大学肾脏病研究所 浏览次数:0次

目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及机制。

方法 采用贴壁法制备人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)。足细胞分组:(1)正常糖组(NG);(2)高糖组(HG);(3)甘露醇渗透压对照组组(NG+MA);(4HUC-MSCs和足细胞transwell共培养组(HUC-MSCs)。刺激72h后,蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白PARPBcl-2的表达,流式细胞术检测足细胞凋亡率,Hoechst染色检测足细胞凋亡水平。ELISA检测HUC-MSCs分泌HGF水平。同时,采用HGF抗体,或rhHGF,探讨HGFHUC-MSCs抗凋亡机制中的作用。

结果

1. 处理72h后,免疫印迹法显示:与NG组比较,HG组凋亡标志蛋白PARP的表达增多、Bcl-2表达减少(P<0.05),与HG组比较,HUC-MSCs共培养组PARP的表达减少、Bcl-2表达增加(P<0.05)。流式细胞术显示:与NG组比较,HG组足细胞凋亡率增多(P<0.05);与HG组比较,HUC-MSCs共培养组足细胞凋亡率减少(P<0.05)。Hoechst染色显示:HG组足细胞呈现典型凋亡形态; HUC-MSCs共培养组细胞核形态正常。NG+Ma组无凋亡指标改变。

3. ELISA检测HUC-MSCs分泌大量HGF与高糖组比较,rhHGFPARP的表达减少、Bcl-2表达增加(P<0.05),足细胞凋亡率减少(P<0.05)。与HUC-MSCs组比较,加入HGF中和抗体后PARP的表达增多,Bcl-2表达减少(P<0.05)足细胞凋亡率增多(P<0.05)。

结论

1. HUC-MSCs可以减轻高糖诱导的足细胞凋亡。

2. HUC-MSCs对高糖诱导足细胞凋亡的保护作用与分泌HGF有关。


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