目的 构建针对人LKB1(liver kinase B1，或STK11 serine/threonine protein kinase11)基因的特异性短发卡RNA（short hairpin RNA, shRNA）表达的慢病毒载体，并观察转染人肝癌细胞Huh7后对LKB1 mRNA和蛋白的表达。
方法 根据人LKB1的基因信息，设计3条针对LKB1基因cds区的siRNA序列，同时设计1条negative序列用于RNAi阴性对照（Negative Control, NC），组建与shRNA相对应的4对互补的单链DNA。将合成的序列插入空载体GV115（元件顺序为：hU6-MCS-CMV-EGFP）中，重组获得慢病毒载体。进行测序鉴定后，再转染293T细胞产生病毒液，得到的病毒液再转染肝癌细胞株Huh7。荧光显微镜观察转染后细胞的情况，实时荧光定量PCR检测转染后细胞LKB1 mRNA的表达情况，Western印迹法检测转染后细胞LKB1蛋白的表达情况。
结果 成功构建含shRNA LKB1的慢病毒载体，人肝癌细胞株Huh7转染后LKB1 mRNA和蛋白表达显著下调。结合感染后的细胞照片，判定shRNA LKB1-2(KD2)组为有效靶点组。
结论 成功获得阻断人肝癌细胞株Huh7 LKB1表达的shRNA序列，并构建慢病毒载体，人肝癌细胞株Huh7转染后LKB1 mRNA和蛋白表达显著下调，为后期研究提供了实验基础。