目的 研究HUVECs在持续性及波动性高糖作用下内质网应激及凋亡的变化情况；探讨GLP-1的保护作用及其机制。

方法

1) 用不同浓度葡萄糖处理内皮细胞，在不同时间检测凋亡率、细胞活力以及GRP78、JNK和P-JNK的表达水平。根据结果确定实验模型：葡萄糖浓度30mmol/L，时间48h，将高糖与正常葡萄糖每12h交替一次，共48h作为波动性高糖干预模式。

2) 用不同浓度的GLP-1处理正常及高糖组细胞，根据GLP-1干预前后细胞活力的变化，选定GLP-1的工作浓度10 nmol/L。分析在此浓度下不同时间高糖组内皮细胞GRP78表达水平的变化。

3) 进一步分组：对照组、高糖组及波动性高糖组分别加用GLP-1干预48h，检测干预前后内皮细胞凋亡率、GRP78以及P-JNK表达水平的变化。

结果

1)不同浓度的高葡萄糖处理均使细胞活力下降；10 mmol/L及30 mmol/L葡萄糖处理使细胞凋亡率增加。

2) 高糖处理3h GRP78表达水平开始升高，6h达高峰，12h开始下降；高糖处理不同时间，各组P-JNK表达量均增加；

3) 持续性和波动性高糖处理均使细胞凋亡率增加；加入GLP-1干预后，细胞凋亡率均显著降低。

4) 与持续性高糖组相比，波动性高糖处理48h后，内皮细胞GRP78的表达水平降低；两组细胞加入GLP-1干预后，GRP78的表达水平增加至2倍以上；持续性高糖及波动性高糖处理均使P-JNK表达水平升高，后者加入GLP-1干预后P-JNK表达水平下降。

结论

1) 持续性高糖和波动性高糖处理均使内皮细胞发生内质网应激和凋亡，后者通过进一步抑制防御蛋白GRP78的表达，加重内质网应激。

2) 高糖诱导的内皮细胞GRP78的表达呈时间依赖性。

3) GLP-1降低波动性高糖诱导的内皮细胞凋亡，部分原因可能是通过改善内质网应激、抑制JNK通路的激活实现的。