目的 探讨足细胞自噬在白藜芦醇减少高糖所致的足细胞凋亡中的作用及其可能的分子机制。

方法 体外培养人足细胞系，分别用正常糖、高糖（30mM）、高糖+白藜芦醇干预组（5μM、10μM、15μM）分别培养48h。Western blot检测足细胞自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅱ、自噬相关蛋白5（ATG5）的表达；透射电镜观察足细胞自噬小体的形成；荧光显微镜观察转染GFP-LC3荧光蛋白后绿色荧光蛋白颗粒的变化。Western blot检测足细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3、bax的表达，Annexin V-FITC PI双染流式细胞技术检测细胞凋亡率。自噬抑制剂3MA及ATG5 shRNA抑制自噬后用Western blot检测足细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3、bax的表达，Annexin V-FITC PI双染流式细胞技术检测细胞凋亡率。

结果 1.与对照组相比，高糖+白藜芦醇干预组的足细胞LC3-Ⅱ蛋白、ATG5蛋白的表达随白藜芦醇浓度增大而逐渐增加，15μM增加最明显，差异有显著性（P<0.05）。透射电镜下高糖+白藜芦醇干预组的足细胞自噬小体形成最多；荧光显微镜下足细胞转染GFP-LC3绿色荧光蛋白颗粒最多。2.与对照组相比，加入白藜芦醇后凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3逐渐减少，早期和晚期凋亡率亦逐渐减少。3. 自噬抑制剂3MA及ATG5 shRNA抑制自噬后，高糖+白藜芦醇干预组Cleaved caspase-3增加，早期和晚期凋亡率亦增多。