目的 观察1,25（OH）₂D₃ （VD3）对软脂酸（PA） 诱导胰岛素抵抗（IR）人脐静脉内皮细胞(HUVECs )NO产生及胰岛素信号传导通路Akt/eNOS和ET-1的影响，明确VD3对血管内皮细胞的保护作用。

方法 0.6mM PA诱导HUVECs 18h后，建立IR内皮细胞模型，设置正常细胞对照组，用1nM VD3干预IR内皮细胞不同时间（0.5h，1h，2h，4h，8h，16h），取细胞上清液用硝酸盐/亚硝酸盐荧光检测试剂盒检测NO分泌量，细胞免疫荧光法检测VDR在各组细胞的表达及分布，荧光定量PCR法检测基因ET-1 mRNA和VDRmRNA的水平，WB检测各组细胞蛋白peNOS（Ser1177），pAkt（S473）的相对表达量。

结果 1.与正常组比较，PA干预组HUVECs NO产量明显减少（0.5065±0.0301 vs 0.7102±0.0438μM，p ＜0.01）。VD3+PA干预组HUVECs NO产生增加，其中在30s和60s时差异有统计学意义（p 均＜0.01）。2.VDR在各组细胞核和细胞质都有表达；PA干预组VDR表达呈减弱的趋势，但无统计学意义（p ＞0.05）；3.0.6mM PA干预内皮细胞后，ET-1 mRNA表达较正常组明显升高（4.52E-04±1.13E-04 vs 3.18E-05±9.47E-06，p ＜0.05），加入VD3后各时间点ET-1 水平明显降低（p 均＜0.05）。各组间VDR mRNA的水平差异无统计学意义；4.不同浓度的VD3（0.01, 0.1, 1, 10, 100nM）干预胰岛素抵抗内皮细胞1h后peNOS，pAkt表达量增加，在1nM时表达量最高（p 均＜0.05）。

结论 VD3可激活IR内皮Akt/eNOS通路合成NO，抑制ET-1的合成保护血管内皮。