目的 探讨孤儿核受体NR2E1对胰岛β细胞增殖凋亡的影响。
方法 构建慢病毒包装的过表达NR2E1载体,利用慢病毒载体转染小鼠胰岛瘤细胞系MIN6细胞,利用二甲基噻唑(MTT)法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)、免疫蛋白印迹(Western-blot)、流式细胞仪等检测NR2E1对胰岛β细胞增殖活力、细胞周期、细胞凋亡等的影响。
结果 相对于空载体转染的MIN6细胞,过表达NR2E1的MIN6细胞发能够通过增加细胞周期S期的比例(39.25% ± 0.67% vs 33.20% ± 0.93%,P<0.05)及增加PCNA(Proliferating cell nuclear antigen)基因表达(1.21±0.10 vs 1.00±0.14,P<0.05)来提高MIN6细胞增殖活力,同时过表达NR2E1可以增加凋亡相关Bcl-2蛋白的表达((0.49±0.01 vs 0.43±0.03,P<0.01)以及减少ERK的磷酸化水平(0.08±0.01 vs 0.17±0.04,P<0.01),但是过表达NR2E1的MIN6细胞的凋亡率与空载体组相比较差异无统计学意义((1.37 ± 0.26% vs 1.44± 0.16%,P>0.05),与胰岛素分泌相关基因PDX-1表达差异无统计学意义(1.03±0.04 vs 1.00±0.04,P>0.05)。
结论 上调孤儿核受体NR2E1的表达可提高胰岛β细胞的增殖活力。