目的 近年研究指出，肝脏能特异性分泌一些细胞因子，称作肝脏因子(Hepatokines)，以调节肝脏自身及全身的糖脂代谢途径，参与肥胖、胰岛素抵抗等病理生理过程。诸多人群和动物研究的结果均表明：肝脏因子-胎球蛋白A 的表达(Fetuin A)在肥胖个体中显著升高，进而促进胰岛素抵抗和2型糖尿病的发生。然而目前对于其表达异常的分子机制，尚未明确。本研究拟从Fetuin A蛋白稳定性的角度，探讨肥胖时Fetuin A表达异常的机制。
方法 （1）构建瞬时过表达Fetuin A的HEK293T细胞模型和稳定过表达Fetuin A的HepG2细胞模型，给予上述细胞药物环己酰胺(Chx)处理，以抑制Fetuin A的蛋白合成，检测Fetuin A蛋白的自然降解情况。（2）在HEK293T细胞中过表达Fetuin A与泛素分子（ubiquitin），通过免疫共沉淀实验，检测Fetuin A与泛素分子的相互作用。（3）HEK293T细胞中，分别过表达Fetuin A和泛素化E3连接酶FBWX7，观察FBWX7是否能调节Fetuin A的蛋白稳定性。（4）免疫共沉淀实验检测FetuinA与FBWX7的蛋白-蛋白相互作用。（5）HEK293T细胞过表达泛素分子和Fetuin A，给予MG132处理以抑制泛素化蛋白降解，免疫共沉淀实验观察过表达FBWX7能否促进Fetuin A的泛素化。
结果 （1）Chx实验表明Fetuin A蛋白易被泛素-蛋白酶体降解。（2）E3连接酶FBXW7过表达后，Fetuin A同泛素分子的连接增加，导致其蛋白稳定性降低。
结论 上述体外实验表明：FBXW7介导的Fetuin A的蛋白降解途径，可能在Fetuin A的表达调控机制中起着重要作用。进一步通过体内实验，证实FBXW7对Fetuin A的降解机制，将有助于揭示其表达异常的分子机制，从而为肥胖、胰岛素抵抗的病理生理过程提供新的线索。