目的 探讨胰腺十二指肠同源盒-1(Pdx-1)、神经元素3(Ngn3)及高糖培养环境对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞(IPCs)的作用。
方法 构建真核表达载体pcDNA3.l(+)/(zeo)-Ngn3、pcDNA3.l(+)-Pdx-1,分离培养BMSCs,脂质体介导转染BMSCs,并筛选稳定转染细胞培养于高糖培养液,RT-PCR检测胰腺内分泌细胞相关因子神经元素3(Ngn3)、巢蛋白(Nestin)、胰十二指肠同源同源盒1(Pdx-1)mRNA的表达,ELISA法检测细胞培养上清中胰岛素浓度。
结果 分离的细胞表面高表达CD44、CD105,而低表达CD34阴性,符合BMSCs特征;诱导过程中BMSCs形态上趋向胰岛样细胞分化且分泌胰岛素,Pdx-1、Ngn3及Nestin mRNA表达上调。
结论 Pdx-1、Ngn3联合高糖可以诱导BMSCs向IPCs分化并分泌胰岛素。