目的 观察高糖状态下miR-335-5p对成骨细胞功能的影响并探讨其可能分子机制。
方法 用不同浓度葡萄糖(5.5、22mmol/L)分别培养MC3T3-E1成骨细胞7天,MTT比色分析法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR检测细胞miR-335-5p与DKK1 mRNA的表达,Western Blot检测DKK1及caspase-3的蛋白表达水平。随后分别向MC3T3-E1成骨细胞转染agomir-335-5p和agomir NC,高糖培养7天,再次检测以上指标。
结果 转染前,高糖组细胞的增殖明显低于对照组,凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。高糖组miR-335-5p mRNA表达明显低于对照组(P<0.05),但两组间DKK1的mRNA表达无显著差异(P>0.05)。高糖组DKK1与caspase-3的蛋白表达显著高于对照组(P<0.05)。转染agomir- 335-5p后,细胞的miR-335-5p mRNA水平较转染前及转染agomir NC组升高(P<0.05),但对DKK1的mRNA水平无影响(P>0.05);增殖明显高于转染前与agomir NC组,凋亡率显著低于转染前及agomir NC组(P<0.05);DKK1与caspase-3的蛋白表达较转染前及agomir NC组显著降低(P<0.05)。
结论 高糖状态下,miR-335-5p可能通过对DKK1进行转录后调控,从而调节成骨细胞的增殖和凋亡。